溫度下細(xì)胞保留的時間幾乎是無限的。凍存過程中盡力選用細(xì)胞疏密程度降低溫度速度及復(fù)蘇時溫度、消融速度等都對細(xì)胞活力有影響。為了保留細(xì)胞,尤其是不易取得的突變形細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。而后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入低溫培養(yǎng)箱中施行培育。
復(fù)蘇普通認(rèn)為合適而使用快融辦法,即從液氮中抽取凍存管后,迅即放入36度水中,使之在一分鐘內(nèi)迅疾融化。
將獲得的團(tuán)體細(xì)胞接入培養(yǎng)箱或培育板中的過程稱為培育。如系團(tuán)體塊培育則直接將團(tuán)體塊接入培育盛器底部,幾個鐘頭后團(tuán)體塊可貼牢在底部,再參加營養(yǎng)物質(zhì)。
正在培育中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時間仔細(xì)查看一次,仔細(xì)查看的內(nèi)部細(xì)胞是否成長令人滿意,形態(tài)是否正常,有無污染,營養(yǎng)物質(zhì)的PH 是否太酸或太堿由酚紅指使劑指使,這個之外對培育溫度和CO2 液體濃度也要定時查看。每傳代一次稱之為一代。二倍體細(xì)胞普通只能傳幾十代,而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可無限地傳代下去。普通原代培育進(jìn)入了培育后有一段潛伏時期數(shù)鐘頭到數(shù)十天不等,在潛伏時期細(xì)胞普遍不分裂,但可貼壁和游走。細(xì)胞長滿瓶底后要施行傳代培育,將一瓶中的細(xì)胞克化懸浮后分至兩到三瓶接著培育。培育正在成長中的細(xì)胞是施行各種有生命的物質(zhì)醫(yī)學(xué)實驗的令人滿意材料。如系細(xì)胞培育,普通應(yīng)在接入培育盛器之向前邁進(jìn)行細(xì)胞統(tǒng)計,按要求以一定的量以每毫升細(xì)胞數(shù)表達(dá)接入培育盛器并直接參加營養(yǎng)物質(zhì)。轉(zhuǎn)化細(xì)胞有可能具備惡性性質(zhì),也有可能僅有不死性而無惡性。
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